免離心流程–可選磁珠吸附獲得上清,避免手工離心去沉淀步驟
高產(chǎn)量–獲得高達200μg的質(zhì)粒DNA
快速–從收集細菌開始,可在70分鐘內(nèi)處理24個樣品,無需人工干預
通用型強—可適用于50mL不同菌液和質(zhì)粒
轉(zhuǎn)染級別–可獲得<0.1 EU/μg的無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA
高純提取–產(chǎn)物無污染,A260/A280>1.8、A260/A230>2.0
磁珠法無內(nèi)毒素質(zhì)粒中量提取試劑盒可用于提供內(nèi)毒素水平為<0.1 EU/μg的高質(zhì)量質(zhì)粒DNA,下游產(chǎn)物可直接應用于真核轉(zhuǎn)染和其他對內(nèi)毒素水平敏感的體外應用。
該試劑盒采用基于磁珠的技術(shù),可在≤50mL LB或≤10mL TB菌液,或其他合適的生長培養(yǎng)基中純化質(zhì)粒DNA。磁珠法無內(nèi)毒素質(zhì)粒中量提取試劑盒可在大多數(shù)開放式全自動移液平臺和基于磁珠法的核酸提取儀上實現(xiàn)自動化提取。產(chǎn)量可因質(zhì)粒的拷貝數(shù)、使用的大腸桿菌菌株、培養(yǎng)基和生長條件而異。
磁珠法無內(nèi)毒素質(zhì)粒中量提取試劑盒采用改良的堿裂解方法先制備出樣品裂解液。然后使用磁珠Mag-Bind® Particles LC(可按需求另購)或Lysate Clearance Filter Syringe(可按需求另購)或離心分離沉淀物。新型超順磁性磁珠Mag-Bind®Particles LC會與細胞碎片發(fā)生結(jié)合,利用磁性吸附將沉淀帶出。即可實現(xiàn)無離心方案,使其更適用于高通量、自動化的工作流程。
制備出裂解上清后,質(zhì)粒DNA通過特殊配制的結(jié)合緩沖液與Mag-Bind®磁珠結(jié)合,然后經(jīng)過洗滌程序去除內(nèi)毒素、鹽和其他污染物。最后使用無內(nèi)毒素水洗脫高質(zhì)量的質(zhì)粒DNA,產(chǎn)物即可應用于廣泛的下游應用,如轉(zhuǎn)染、常規(guī)篩選、限制性內(nèi)切酶消化、轉(zhuǎn)化、PCR和DNA測序等。
應用:轉(zhuǎn)染、常規(guī)篩選、限制性內(nèi)切酶消化、轉(zhuǎn)化、PCR、DNA測序、體外轉(zhuǎn)錄和其他需要純凈DNA的應用
樣本:LB≤50mL菌液或TB≤10mL菌液
處理時間:70min完成1-24個樣本
結(jié)合能力:200ug
洗脫體積:100ul
1. Q公司對比,得率更高,操作更方便
按照說明書操作步驟,使用磁珠法無內(nèi)毒素質(zhì)粒中型試劑盒以及競品公司的試劑盒,從DH5α培養(yǎng)基(n=3)中提取不同類型和大小的質(zhì)粒。使用Thermo Scientific 的NanoDrop™ 2000c分光光度計對提取的質(zhì)粒DNA進行測定。所有質(zhì)粒產(chǎn)量均具有可比性,上圖顯示Omega Bio-tek試劑盒優(yōu)于競品公司試劑盒。
2. 與T公司相比,轉(zhuǎn)染效率更高
從5mL DH5α培養(yǎng)基(n=3)制備質(zhì)粒pGL4.51,并使用MagBinder® Fit24核酸提取儀上的磁珠法質(zhì)粒中量提取試劑盒與競品公司的等效試劑盒進行提取。使用2μL Lipofectamine轉(zhuǎn)染試劑,將200ng提取好的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到10,000個細胞中。使用Omega Bio-tek試劑盒提取的質(zhì)粒生物發(fā)光信號更高,與競品公司相比,轉(zhuǎn)染效率更高。
3. 與T公司相比,質(zhì)粒產(chǎn)量顯著提高
在MagBinder® Fit24核酸提取儀上,使用磁珠法無內(nèi)毒素質(zhì)粒中量提取試劑盒以及競品公司試劑盒,按照說明書操作步驟,從5mL DH5α培養(yǎng)基(n=3)中純化pGEM和pGL4.51質(zhì)粒。使用Thermo Scientific 的NanoDrop™ 2000c分光光度計對純化的質(zhì)粒DNA進行測定。Omega Bio-tek試劑盒的質(zhì)粒純化不僅不含內(nèi)毒素(<0.1 EU/μg),而且與競品公司的試劑盒相比,產(chǎn)量也顯著更高。
4. 適用于各種質(zhì)粒類型和培養(yǎng)基
磁珠法無內(nèi)毒素質(zhì)粒中量提取試劑盒可處理各種樣品初始條件,如不同質(zhì)粒類型、分子量、培養(yǎng)基以及初始培養(yǎng)體積。質(zhì)粒產(chǎn)量可能因條件不同而存在差異。