該方法采用了Omega公司的中量RNA結(jié)合柱,能快速簡單地從小于500mg新鮮或凍藏的植物樣品中提取高達(dá)500μg的高純度的總RNA。提取過程不需要用到有毒的酚氯仿等有機(jī)物抽提,也不需要用到耗時的異丙醇或乙醇沉淀,純化的RNA幾乎不含有蛋白質(zhì)和糖酚類等抑制因子的污染,可直接用于RT-PCR、Northern雜交和核酸保護(hù)等下游實驗。 新鮮植物組織(細(xì)胞)磨碎后經(jīng)裂解液裂解;過濾去除殘渣;加入無水乙醇調(diào)節(jié)RNA與柱子的結(jié)合條件,然后轉(zhuǎn)移至RNA柱上離心吸附RNA;經(jīng)三次快速洗滌去除殘留的蛋白質(zhì)和鹽等雜質(zhì),最后RNA溶解于DEPC水中。
安全-無酚氯仿等有機(jī)物抽提
穩(wěn)定-操作簡單,每次都能獲得理想的效果
快速-可在60min內(nèi)完成一次抽提工作
可靠-純化的RNA不會發(fā)生降解,純度高